遺傳毒理
體外哺乳類細(xì)胞HGPRT基因突變試驗
細(xì)胞在正常培養(yǎng)條件下,能夠產(chǎn)生次黃嘌呤鳥嘌嶺磷酸核糖轉(zhuǎn)移酶(HGPRT),在含有6-硫代鳥嘌呤(6-thioguanine,6-TG)的選擇性培養(yǎng)液中,HGPRT催化產(chǎn)生核苷-5'-單磷酸(NMP),NMP摻入DNA中能夠致細(xì)胞死亡。在致癌和(或)致突變物作用下,某些細(xì)胞X染色體上控制HGPRT的結(jié)構(gòu)基因發(fā)生突變,不能再產(chǎn)生次黃嘌呤鳥嘌嶺磷酸核糖轉(zhuǎn)移酶(HGPRT),從而使突變細(xì)胞對6-TG具有抗性作用,能夠在含有6-TG的選擇性培養(yǎng)液中存活生長。
在加入和不加入代謝活化系統(tǒng)的條件下,使細(xì)胞暴露于受試物一定時間,然后將細(xì)胞再傳代培養(yǎng), 在含有6-TG的選擇性培養(yǎng)液中,突變細(xì)胞可以繼續(xù)分裂并形成集落。根據(jù)突變形成的集落數(shù),計算突變頻率以評價受試物的致突變性。
迅數(shù)光染色微孔板影像分析儀憑借其強(qiáng)大的分析功能和精確的圖像識別與分割技術(shù),能夠成功地應(yīng)用于體外哺乳類細(xì)胞HGPRT基因突變試驗,判斷受試物致突變能力的強(qiáng)弱,評價其對哺乳動物細(xì)胞造成的影響。
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